激光掃描共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源，在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦原理和裝置，並利用計算機對所觀察的對象進行數字圖象處理的一（yī）套觀察（chá）、分（fèn）析和輸出係統。把光學成像的分辨率提高了30%~40%，使用紫外或可見光激發熒光探針，從而得到細胞或組織內部微細結構（gòu）的（de）熒光圖像，在亞細胞水平（píng）上觀察生理信號及細胞形態（tài）的變化，成為形態學，分子生物學，神經科學，藥理學，遺（yí）傳學（xué）等領（lǐng）域（yù）中新一代的研究工具。

1 激光掃描（miáo）共聚焦顯微鏡的原理

從基本原（yuán）理上講,共（gòng）聚（jù）焦顯微鏡是（shì）一（yī）種現代化的光學顯微（wēi）鏡（jìng）,它對普通光鏡從技術上作了以下幾點改進:

1、采用（yòng）點掃描技術（shù）將樣品分解成二維或三維空間（jiān）上的無數點,用十分細（xì）小的激光束(點光源)逐點逐行掃描成像,再通過微機組合成一個整體平麵的或立體的像。而傳統的光（guāng）鏡是在場光源下一次成像的,標本上每一點的圖像（xiàng）都會受到相鄰點的衍射光和（hé）散射光的（de）幹擾。這兩種（zhǒng）圖（tú）像的清晰度和精密（mì）度是無（wú）法相比的。

2、用計算機采集和處理光信號,並利用光電倍增管放大信號圖

3、用激（jī）光做光源因為激光的單色性非（fēi）常好,光源波束的波長相同,從根本上（shàng）消除了色差。

4、采用共聚焦技（jì）術在物鏡的焦平麵上放置了一個當中（zhōng）帶有小孔（kǒng）的擋板,將焦平（píng）麵以外的雜（zá）散光擋住,消除（chú）了球差;並進一步消除了色差（chà）。

在共聚焦顯微鏡（jìng）中（zhōng）,計算（suàn）機代替了人眼（yǎn）或（huò）照相機進行觀察、攝像,得到的圖像是數字化的（de）,可以在電腦中進行處理,再一次提高圖像的清晰度。而且利用了光電倍增管,可以將很微（wēi）弱（ruò）的信號放大,靈敏度大大提高。由於綜合利用了以上技術。可以說ＬＳＣＭ是（shì）顯微（wēi）鏡製作技術（shù）、光（guāng）電技術、計算機技術的完美結（jié）合,是現代技術發展的必然產物。

2 激光掃描共聚焦顯微鏡在生物醫學研究中的應用

目（mù）前,一台配置（zhì）完備的ＬＳＣＭ在功能上已（yǐ）經完全能夠取代以往的任何一種光學（xué）顯微鏡,它相當於多種製作精良的常用光學顯微鏡的有機組合,如倒置光學顯微鏡、紫外線顯微鏡、熒光顯微鏡、暗視野顯微鏡（jìng）、相差顯微鏡(ＰＨ)、微分幹涉（shè）差顯微鏡（jìng）(ＤＩＣ)等,因此被稱為萬能顯微鏡,通過它所得到的精細圖像可使其他的（de）顯微鏡圖像無（wú）比（bǐ）遜色。

1、生化成分精確定位觀察配合專用的分子探針,對於要檢測的成分不僅可以定位到細胞

2、觀察活細胞、活組織ＬＳＣＭ在不損傷細胞的前提下,對活組（zǔ）織、活細胞進行觀察（chá）和測（cè）量，這不僅省（shěng）去了繁（fán）瑣的樣品前期處理過程(如脫水、脫蠟、染色等);而且觀察過的樣品還可以繼續用於其他的研（yán）究。這種（zhǒng）功能對於細胞培（péi）養、轉基因研究尤為重要。這可以說是ＬＳＣＭ最大的優（yōu）勢。

3、定（dìng）量測量（liàng）首（shǒu）先應用專一的熒光探針對樣品進行染色,樣品的（de）熒光強度（dù）和所測成（chéng）分（fèn）的含量呈正比,如果其餘條件固定,通過對比各組樣品之間的熒光強度值,可得出特定成分的含量比。

4、動態觀察在同一樣品平麵上隨時間（jiān）進行連續掃（sǎo）描,就可分析細胞結構、內含、和標記等動力學變化。目前在這方麵做得最多的是使用ＬＳＣＭ觀察心肌或平（píng）滑肌（jī）細胞內遊離鈣、鈉、鉀離子濃度或ｐＨ的動（dòng）態變化。

5、數據、圖像（xiàng）的數字化用計算機代替了普通的照相機,得到的圖像是數字化（huà）的（de）,可及時輸出或長期儲存,而且還可進一步（bù）加工處理。